、操作形成厌氧环境
1 、调整混氮气瓶 、合气瓶输出压力 :调节减压阀,使输出压力为0.1Mpa左右 。
2 、接通电源开关 ,开控温仪 ,调节所需温度 ,操作室里的培养箱内的温度可任意选择和控制 。
3 、按使用要求放置好必要的配件和器具 ,并向操作室内放入二个无毒塑料袋 。
4 、操作室内放入经过干燥过1000g钯粒(封闭)和500g干燥剂 ,并放入厌氧指示剂(封闭) 。
5 、 关紧取样室内外门 ,并抽真空校验 。
6 、操作室内第次置换(氮气置换) :
(1)先用橡皮管插入操作室内进气口 ,另头插入塑料袋 。
(2)接通氮气进气路 ,打开氮气控制阀 ,使二只塑料袋充足氮气 ,然后扎紧袋口 。
(3)把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧 。
(4)把塑料袋内氮气渐渐地放于操作室内 ,至全部放出 。
7 、操作室第二次置换(氮气置换)重复次充氮过程 ,并注意随时开闭排气阀 。
8 、操作室第三次置换(混合气体置换) :
(混合气体配比为 :N2 90% ;H2 5% ;CO2 5%) 。
(1)调换气路打开混合气道通阀门进气 ,充气时要随时开闭排气阀 。
(2)混合气充满塑料袋后 ,关掉混合气直通阀(三通阀) 。
(3)把塑料袋内混合气渐渐排于操作室内 。
(4)通过三次换气后 ,操作室内气体含氧量已处于极微量状态 。
9 、操作室内打开钯粒除氧剂 ,接通除氧催化器电源进行催化除氧 ,小时后打开厌氧指示条观察其变色情况 ,变色为操作室内达到厌氧环境 。
10 、开紫外线灭菌灯 ,室内进行灭菌处理 。灭菌时间自定 。
二 、菌种的置入和培养
1 、检查取样室内门并关紧之 。
2 、打开取样室外门 ,将菌种放入取样室后即关上外门 。
3 、 取样室充氮置换三次过程 :先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停 ,然后人工打开氮气阀门进气 ,使指针回复零位后进行下次操作 。
4 、如选定真空度较低就需要增加置换的次数 。
5 、取样室内外门开启 ,关紧要抽低真空度100毫米汞柱(13 Kpa)检验及帮助操作 。
6 、厌氧培养箱需要长期连续使用的条件 :
(1)每天在操作室内观察厌氧指示条 ,正常情况下可继续使用 。如不正常就必须重新换气 。
(2)要长期连续输入微量的混合气体 ,使补进的氢气能和微量的氧结合通过催化吸收 ,保证了室内厌氧状态 ,补入混合气流量选定为每分钟10毫升左右 。
(3)连续培养运行天 ,更换次除氧剂和干燥剂 。
7 、接种棒灭菌器的应用 :
(1)随时用镍铬电热丝使电极短路而变赤热以进行杀菌(接种棒) 。
(2)熔蜡处可直接放上 ,试管封蜡口旋转熔蜡 。
厌氧培养箱是种在无氧环境下进行细菌培养及操作的专用装置,可培养难生长的厌氧升物,又能避免以往厌氧生物在大气操作时接触氧气而死亡的危险 。广泛应用于医学 、免疫学 、遗传学 、微生物 、农业科学 、药物学的研究和生产 ,已经成为上述领域实验室常用的仪器 。我们在使用如何正确规范的操作厌氧培养箱呢 ,下面就做简单介绍 。
、操作形成厌氧环境
1 、调整混氮气瓶 、合气瓶输出压力 :调节减压阀 ,使输出压力为0.1Mpa左右 。
2 、接通电源开关 ,开控温仪 ,调节所需温度 ,操作室里的培养箱内的温度可任意选择和控制 。
3 、按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室内放入二个无毒塑料袋 。
4 、操作室内放入经过干燥过1000g钯粒(封闭)和500g干燥剂 ,并放入厌氧指示剂(封闭) 。
5、 关紧取样室内外门 ,并抽真空校验 。
6 、操作室内第次置换(氮气置换):
(1)先用橡皮管插入操作室内进气口 ,另头插入塑料袋 。
(2)接通氮气进气路 ,打开氮气控制阀 ,使二只塑料袋充足氮气 ,然后扎紧袋口 。
(3)把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧 。
(4)把塑料袋内氮气渐渐地放于操作室内 ,至全部放出 。
7 、操作室第二次置换(氮气置换)重复次充氮过程 ,并注意随时开闭排气阀 。
8 、操作室第三次置换(混合气体置换) :
(混合气体配比为 :N2 90% ;H2 5% ;CO2 5%)。
(1)调换气路打开混合气道通阀门进气 ,充气时要随时开闭排气阀 。
(2)混合气充满塑料袋后 ,关掉混合气直通阀(三通阀)。
(3)把塑料袋内混合气渐渐排于操作室内 。
(4)通过三次换气后 ,操作室内气体含氧量已处于极微量状态 。
9 、操作室内打开钯粒除氧剂 ,接通除氧催化器电源进行催化除氧 ,小时后打开厌氧指示条观察其变色情况 ,变色为操作室内达到厌氧环境 。
10 、开紫外线灭菌灯 ,室内进行灭菌处理 。灭菌时间自定 。
二 、菌种的置入和培养
1 、检查取样室内门并关紧之 。
2 、打开取样室外门 ,将菌种放入取样室后即关上外门 。
3、 取样室充氮置换三次过程 :先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停 ,然后人工打开氮气阀门进气,使指针回复零位后进行下次操作 。
4 、如选定真空度较低就需要增加置换的次数 。
5 、取样室内外门开启 ,关紧要抽低真空度100毫米汞柱(13 Kpa)检验及帮助操作 。
6 、厌氧培养箱需要长期连续使用的条件 :
(1)每天在操作室内观察厌氧指示条 ,正常情况下可继续使用 。如不正常就必须重新换气 。
(2)要长期连续输入微量的混合气体 ,使补进的氢气能和微量的氧结合通过催化吸收 ,保证了室内厌氧状态 ,补入混合气流量选定为每分钟10毫升左右 。
(3)连续培养运行天 ,更换次除氧剂和干燥剂 。
7 、接种棒灭菌器的应用 :
(1)随时用镍铬电热丝使电极短路而变赤热以进行杀菌(接种棒) 。
(2)熔蜡处可直接放上 ,试管封蜡口旋转熔蜡 。